也許一提到CRISPR/Cas技術(shù)，人們的第一反應(yīng)是，CRISPR/Cas技術(shù)是一個(gè)高效的基因編輯系統(tǒng)。其實(shí)，CRISPR/Cas系統(tǒng)是一個(gè)多面手，不僅具有高效基因操作功能，還具有分子檢測(cè)能力。CRISPR/Cas是（clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR associate）成簇規(guī)律間隔短回文重復(fù)序列及相關(guān)蛋白質(zhì)縮寫(xiě)，它是微生物的天然“免疫系統(tǒng)”。
CRISPR/Cas系統(tǒng)在引導(dǎo)RNA（guide RNA，gRNA）的引導(dǎo)下識(shí)別目標(biāo)核酸（DNA/RNA）序列后，激活Cas蛋白對(duì)靶向和非靶向核酸（DNA/RNA）分子切割。CRISPR/Cas系統(tǒng)在靶向識(shí)別和切割過(guò)程中轉(zhuǎn)化靶標(biāo)核酸分子信號(hào)為檢測(cè)儀器或肉眼可觀察的信號(hào)。
根據(jù)檢測(cè)核酸分子時(shí)是否需要體外核酸擴(kuò)增，CRISPR/Cas技術(shù)核酸檢測(cè)可分為輔助體外核酸擴(kuò)增檢測(cè)和無(wú)體外核酸擴(kuò)增檢測(cè)兩類(lèi)。輔助體外核酸擴(kuò)增檢測(cè)需先利用PCR、重組酶聚合酶等溫?cái)U(kuò)增（RPA）、環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增（LAMP）等技術(shù)，對(duì)靶向核酸序列進(jìn)行體外擴(kuò)增，隨后再通過(guò)CRISPR/Cas系統(tǒng)檢測(cè)靶標(biāo)分子。與之不同，基于CRISPR/Cas的無(wú)體外核酸擴(kuò)增檢測(cè)技術(shù)，能夠直接對(duì)靶標(biāo)核酸進(jìn)行檢測(cè)，具有操作步驟簡(jiǎn)便、檢測(cè)耗時(shí)短、污染風(fēng)險(xiǎn)低等優(yōu)點(diǎn)。
CRISPR/Cas核酸檢測(cè)系統(tǒng)能夠?qū)邢駾NA分子信號(hào)高效轉(zhuǎn)化為熒光、化學(xué)、電化學(xué)等肉眼可見(jiàn)或可檢測(cè)的信號(hào)，以此實(shí)現(xiàn)對(duì)靶標(biāo)核酸信號(hào)分子的精準(zhǔn)檢測(cè)。在實(shí)際應(yīng)用領(lǐng)域，該技術(shù)已廣泛用于多種病原體和基因特征檢測(cè)，包括寨卡、乙腦病毒、非洲豬瘟病毒、嚴(yán)重急性呼吸系統(tǒng)綜合征冠狀病毒2（SARS-CoV-2）、耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的核酸檢測(cè)，以及DNA甲基化分析、HPV16和18基因分型等。值得一提的是，基于CRISPR/Cas13開(kāi)發(fā)的SARS-CoV-2核酸檢測(cè)系統(tǒng)，無(wú)需進(jìn)行體外核酸擴(kuò)增，檢測(cè)下限約為31拷貝/μl，僅需20分鐘即可完成檢測(cè)。此外，同樣基于CRISPR/Cas13構(gòu)建的多通道熒光信號(hào)核酸分子檢測(cè)系統(tǒng)，一次能檢測(cè)169種人類(lèi)相關(guān)病毒核酸，具備高通量、檢測(cè)迅速、成本低廉等顯著優(yōu)勢(shì) 。
隨著對(duì)CRISPR/Cas分子檢測(cè)技術(shù)研究的逐步深入，檢測(cè)的靶標(biāo)分子類(lèi)型也逐漸豐富，可實(shí)現(xiàn)循環(huán)腫瘤細(xì)胞、小分子化合物、蛋白質(zhì)分子、金屬離子、酶活性、抗生素、病原微生物等靶標(biāo)檢測(cè)。檢測(cè)樣本類(lèi)型從單一逐步走向復(fù)雜多樣，涵蓋人的血液、體液、牛奶、食品、環(huán)境樣本等。目前應(yīng)用于非核酸分子檢測(cè)的CRISPR/Cas系統(tǒng)主要有Cas12a和Cas13a。CRISPR/Cas12a可以有效地檢測(cè)外泌體，此過(guò)程通過(guò)適配體技術(shù)與CRISPR/Cas12a技術(shù)聯(lián)合，轉(zhuǎn)化外泌體信號(hào)為儀器可檢測(cè)信號(hào)。伴隨著檢測(cè)系統(tǒng)的優(yōu)化，檢測(cè)時(shí)間從120 ~20 min逐漸縮短，可實(shí)現(xiàn)POCT。CRISPR/Cas檢測(cè)的靶標(biāo)分子從病原微生物到小分化合物，凸顯了CRISPR/Cas可檢測(cè)非核酸靶標(biāo)分子的廣泛性、樣本類(lèi)型的普遍性以及檢測(cè)操作的便捷性，非常適合海關(guān)、車(chē)站、學(xué)校等場(chǎng)所的POCT。
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貨號(hào) |
產(chǎn)品 |
規(guī)格 |
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TABAS03KIT |
TwistAmp Basic Kit DNA擴(kuò)增試劑盒 |
96T |
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TAEXO02KIT |
TwistAmp exo 試劑盒 |
96T |
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B8201C1 |
DNA恒溫快速擴(kuò)增試劑盒（DNA基礎(chǔ)型） |
48T |
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B8202C3 |
DNA恒溫快速擴(kuò)增試劑盒（DNA熒光型） |
48T |
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B8203C5 |
DNA恒溫快速擴(kuò)增試劑盒（DNA試紙條型） |
48T |
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B8204C7 |
RNA恒溫快速擴(kuò)增試劑盒（RNA基礎(chǔ)型） |
48T |
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B8205C9 |
RNA恒溫快速擴(kuò)增試劑盒（RNA熒光型） |
48T |
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B8206C0 |
RNA恒溫快速擴(kuò)增試劑盒（RNA試紙條型） |
48T |
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JY0209 |
雙靶標(biāo)HybriDetect側(cè)向?qū)游鲈嚰垪l（彩虹型） |
50T |
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JY0201 |
單靶標(biāo)HybriDetect側(cè)向?qū)游鲈嚰垪l（彩虹型） |
50T |
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JY0307 |
CRISPR單酶切及擴(kuò)增產(chǎn)物檢測(cè)試紙條 |
50T |
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JY0301 |
CRISPR Cas12/13 HybriDetect試紙條 |
50T |
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JY0308 |
CRISPR雙酶切檢測(cè)試紙條（變色龍） |
50T |
Cas酶系列：
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貨號(hào) |
包裝規(guī)格 |
中文名稱(chēng) |
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32108-01 |
100 pmoL |
LbCas12a (Cpf1) |
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32108-03 |
1,000 pmoL |
LbCas12a (Cpf1) |
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32117-01 |
100 pmoL |
LwaCas13a (C2c2) |
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32117-03 |
1,000 pmoL |
LwaCas13a (C2c2) |
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32118-01 |
100 pmoL |
AapCas12b (C2c1) |
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32118-03 |
1,000 pmoL |
AapCas12b (C2c1) |
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32119-01 |
100 pmoL |
Un1Cas12f1 (Cas14a1) |
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32119-03 |
1,000 pmoL |
Un1Cas12f1 (Cas14a1) |
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32104-01 |
100 pmoL |
AsCas12a (Cpf1) |
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32104-03 |
1,000 pmoL |
AsCas12a (Cpf1) |
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32116-01 |
100 pmoL |
AacCas12b (C2c1) |
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32116-03 |
1,000 pmoL |
AacCas12b (C2c1) |
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32106-01 |
100 pmoL |
FnCas12a (Cpf1) |
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32106-03 |
1,000 pmoL |
FnCas12a (Cpf1) |
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32110-01 |
100 pmoL |
Lb5Cas12a (Cpf1) |
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32110-03 |
1,000 pmoL |
Lb5Cas12a (Cpf1) |
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32101-01 |
100 pmoL |
SpCas9 |
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32101-03 |
1,000 pmoL |
SpCas9 |
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32102-01 |
100 pmoL |
Sp-dCas9 |
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32102-03 |
1,000 pmoL |
Sp-dCas9 |
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32120-01 |
100 pmoL |
Sp-nCas9（H840A） |
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32120-03 |
1,000 pmoL |
Sp-nCas9（H840A） |
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